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表面增強拉曼光譜技術應用于海參中抗生素殘留檢測

發布日期:2022-04-28    

抗生素是由微生物(包括細菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產物,是一類能干擾其它生物細胞發育功能的化學物質。現臨床常用的抗生素大都是由轉基因工程菌培養液液中提取物以及用化學方法合成或半合成的化合物。抗生素在養殖業找那個不僅可以促進動物生長發育還可以幫助動物抵御疾病、治療疾病,在畜牧養殖業中有著廣泛應用。

硝基呋喃類藥物是一種廣譜抗生素,對大多數革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌、真菌和原蟲等病原體均有殺滅作用,曾廣泛應用于畜禽及水產養殖業,用于治療由大腸桿菌或沙門氏菌所引起的腸炎、疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等。但由于硝基呋喃類藥物及其代謝物對人體有致癌、致畸胎副作用,中國衛生部于2010年3月22日將硝基呋喃類藥物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林列入可能違法添加的非食用物質黑名單。

但因硝基呋喃類藥物的價格低廉且藥效顯著,在水產養殖中仍常有違法使用的情況,水產養殖動物中硝基呋喃類藥物殘留仍不容樂觀。根據近年來的風險隱患排查結果,硝基呋喃仍是檢出率最高的違禁藥物之一。

抗生素1.png抗生素2.png抗生素2.png

硝基呋喃類藥物及其代謝物,目前常用的檢測方法有液相色譜法、液相色譜-質譜聯用法等。此類方法需要配備昂貴的液相色譜儀和液相-質譜聯用儀等儀器,所采用前處理方法對和儀器操作對實驗人員也有較高要求,且檢測耗時長、測試成本高,因此限制了色譜法與質譜法在一線監管現場的應用。

表面增強拉曼光譜技術克服了傳統拉曼光譜靈敏度低的缺點,能夠實現痕量物質的檢測,同時還具有樣品前處理簡單、檢測速度快、易實現現場檢測等優點。因此,目前已廣泛應用于食品快檢、環境監測、生物醫學等領域,在食品中農獸藥殘留、限用或禁用添加劑中已展現出良好的應用前景。

如海儀器基于拉曼光譜技術,結合自身在拉曼光譜儀設備和光譜軟件研發優勢推出了拉曼光譜抗生素速測試劑盒。其中呋喃速測試劑盒針對水產品中呋喃類藥物設計,該方案整體檢測耗時在30min內,單次檢測成本不超過15塊,能夠高效、快捷的檢出養殖水及各類水產品中呋喃類藥物殘留。

應用案例

(1)實驗對象

檢測基質:池塘養殖水海參;

檢測項目:呋喃唑酮、呋喃妥因;

注:池塘水和海參已按照GB 31656.13-2021采用液相色譜-串聯質譜法進行測試不含呋喃類藥物。

(2)實驗方案

本次實驗開始前先采用液相-質譜法對養殖水和海參進行檢測,確認兩種基質樣品中不含有呋喃類藥物殘留。采用標準加標的方式配置待測樣本如下表,詳細實驗信息見下表。

實驗編號

實驗樣品

添加藥物

添加濃度(mg/kg

1

養殖水

呋喃妥因

0.1

2

呋喃唑酮

0.1

3

海參

呋喃妥因

1

4

呋喃唑酮

1

*注:養殖水和海參經過確認無呋喃妥因和呋喃妥酮殘留。

(3)測試方法

本次實驗采用如海自研呋喃拉曼速測試劑盒結合前處理一體機對樣品進行前處理,箱體式拉曼光譜儀采集光譜數據,智檢E+軟件進行識別。

樣品前處理過程:稱取1g實驗樣品,加入提取試劑,充分振蕩提取。提取后加入凈化試劑,凈化后進行上機檢測,詳細測試過程請參考如海自研呋喃拉曼速測試劑盒說明書。

(4)儀器與耗材

產品

型號

數量

箱體式拉曼光譜儀

IRS1000

1

前處理一體箱

RFSC-1000

1

比色皿

CVT-721

6

呋喃拉曼快速檢測試劑盒

/

1

(5)測試結果

本次實驗共分為6組,實驗1和2分別是對未添加呋喃藥物的養殖水和海參進行測試,測試譜圖中也未發現呋喃妥因和呋喃唑酮特征位移,測試結果與液相-質譜法相吻合,證明兩種實驗對象中不含呋喃類藥物殘留。實驗3和4是在養殖水中添加呋喃唑酮和呋喃妥因的測試結果,在實驗3測試譜圖中可以明顯發現810、1023、1340、1604cm-1等拉曼特征位移,表明添加了0.1mg/kg的呋喃妥因可以通過拉曼光譜法檢出;根據實驗4的拉曼測試譜圖中784、1038、1190、1339、1453cm-1等拉曼特征位移也可以看出養殖水中添加的呋喃唑酮已被檢出。

抗生素3.png

實驗5和6分別是在海參中添加了呋喃唑酮和呋喃妥因的測試結果,與養殖水測試結果類似的,兩種藥物在海參中也可以通過拉曼光譜法檢出。

抗生素4.png

實驗編號

實驗樣品

添加藥物

添加濃度(mg/kg

是否檢出

1

養殖水

--

--

2

海參

--

--

3

養殖水

呋喃妥因

0.1

4

呋喃唑酮

0.1

5

海參

呋喃妥因

1

6

呋喃唑酮

1

結論

在本次呋喃類藥物測實驗中,小編利用如海自研箱體式拉曼光譜儀結合呋喃拉曼速測試劑盒對添加了呋喃類藥物的養殖水和海參進行測試,添加在兩種樣品中的呋喃唑酮和呋喃妥因均可被準確檢出。